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技术资料/正文
235 人阅读发布时间:2025-08-29 10:00
山羊γ干扰素(IFN-γ)Elisa试剂盒实验说明书
以下是为您整理的山羊γ干扰素(IFN-γ)ELISA试剂盒实验说明书,包含实验原理、操作步骤及注意事项等核心内容。
一、实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法检测山羊血清/血浆中的IFN-γ浓度。其核心流程包括:
包被抗体捕获:微孔板预包抗山羊IFN-γ抗体,与样本中的抗原结合;
酶标抗体反应:加入HRP标记的二抗形成“抗体-抗原-酶标抗体”复合物;
显色与定量:TMB底物显色后,通过450nm波长测定OD值,浓度与吸光度呈正相关。
二、试剂盒组成
组分规格/数量用途说明
30倍浓缩洗涤液20mL×1瓶需按1:29稀释后使用^^2^^
酶标包被板12孔×8条预包被抗山羊IFN-γ抗体
标准品(800ng/L)0.5mL×1瓶用于绘制标准曲线
显色剂A/B液6mL×各1瓶避光保存,现配现用
三、操作步骤
样本处理:
血清/血浆需避免反复冻融,NaN3会抑制HRP活性,需禁用
标准品稀释:
梯度稀释至25-400ng/L范围(示例:800ng/L原液→400ng/L→200ng/L…)
孵育与洗涤:
每孔加样100μL,37℃孵育90分钟。
洗涤3次,每次拍干需更换吸水纸。
显色终止:
加入TMB显色15分钟,终止液终止反应后30分钟内读值。
四、关键注意事项
交叉污染:加样时需更换枪头,避免孔间污染。
温度控制:显色阶段需避光,终止后立即检测。
数据有效性:标准曲线R²应≥0.99,空白孔OD值需<。
注:以上资料仅供参考,不作为实际数据,如需其他请咨询技术老师或品牌供应商。
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