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技术资料/正文
142 人阅读发布时间:2025-08-07 09:16
人白介素2(IL-2)ELISA检测试剂盒说明书
以下是关于人白介素2(IL-2)ELISA检测试剂盒的主要信息整理:
BS-0055人白介素2(IL-2)ELISA试剂盒
一、检测原理
采用双抗体夹心ELISA法,通过包被抗人IL-2抗体捕获样本中的IL-2,再结合生物素化检测抗体和酶标亲和素,最终通过TMB显色反应定量检测IL-2浓度。
二、试剂盒组成
预包被酶标板:96孔板,含抗人IL-2抗体
标准品:通常为冻干粉,需用稀释液复溶(如4000pg/ml)并梯度稀释
检测抗体:生物素标记的抗人IL-2抗体
酶结合物:HRP标记的链霉亲和素
显色/终止系统:TMB底物和终止液(如硫酸)
缓冲液:包括标本稀释液、洗涤液(需1:20稀释)等
三、样本处理要求
样本类型:血清、血浆(EDTA/肝素抗凝)、细胞培养上清、组织匀浆等
保存条件:2-8℃可存48小时,长期需-20℃/-70℃冷冻,避免反复冻融
注意事项:避免使用含NaN3的样本(会抑制HRP活性)
四、操作步骤
标准品稀释:按说明书进行倍比稀释(如4000pg/ml→0pg/ml)
加样孵育:每孔加100μl样本或标准品,37℃孵育120分钟
洗涤:使用稀释后的洗涤液清洗4-6次
加检测抗体:加入生物素化抗体,37℃孵育60分钟
加酶结合物:HRP-链霉亲和素孵育30分钟
显色与终止:加入TMB反应15分钟后终止,450nm测OD值
五、结果计算
以标准品浓度为横坐标、OD值为纵坐标绘制标准曲线,通过样本OD值计算IL-2浓度。检测范围通常为15.6-5000pg/ml,灵敏度可达1pg/ml。
六、注意事项
实验前需平衡试剂至室温,避免浓缩洗涤液结晶
显色时间需严格控制,过浅可适当延长
组织样本需匀浆后离心取上清
注,以上资料仅供参考,如需具体品牌说明书,可参考本生、天正信达或上海分细生物的详细文档。
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