大鼠葡萄糖-6-磷酸酶(G-6-P)ELISA试剂盒实验使用说明书

　　大鼠葡萄糖-6-磷酸酶(G-6-P)ELISA试剂盒实验使用说明书

　　BS-8526大鼠葡萄糖-6-磷酸酶(G-6-P)ELISA试剂盒

　　一、试剂盒组成

　　预包被酶标板：96孔(8×12条)，已包被抗G-6-P抗体

　　标准品：冻干品1瓶，临用前用标准品稀释液复溶至0.5ml，梯度稀释为0.312-20ng/mL

　　检测抗体：生物素化抗G-6-P抗体(100×)，需用抗体稀释液按1:100稀释

　　其他试剂：SABC复合物、TMB显色液(A/B)、终止液、20×浓缩洗涤液、封板胶纸等

　　二、标本收集与处理

　　样本类型：血清、血浆、组织匀浆、细胞培养上清等

　　采集要求：

　　避免溶血、高血脂样本，离心去除悬浮物(3000rpm，10分钟)

　　短期保存(2-8℃≤48小时)，长期需-20℃/-80℃分装，避免反复冻融

　　三、实验步骤

　　洗涤液配制：蒸馏水1:20稀释浓缩洗涤液(如1ml浓缩液+19ml蒸馏水)

　　标准品梯度稀释：取7管标注1/2至1/64，每管加入200μL标准品稀释液，按倍比稀释

　　加样与孵育：

　　每孔加入100μL标准品/样本，37℃孵育90分钟;

　　弃去液体，拍干后加入100μL生物素化检测抗体，37℃孵育60分钟

　　显色与终止：

　　加入SABC复合物100μL/孔，37℃孵育30分钟;

　　加入TMB显色液100μL/孔，避光反应15分钟;

　　加入终止液50μL/孔，终止反应

　　四、数据计算

　　酶标仪450nm波长测定各孔OD值，以标准品浓度为横坐标、OD值为纵坐标绘制标准曲线

　　根据样本OD值通过标准曲线计算G-6-P浓度(单位：ng/mL)

　　五、注意事项

　　试剂保存：未开封试剂4℃保存;开封后标准品需-20℃分装，避免反复冻融

　　误差控制：

　　加样误差≤5%，每步孵育需密封防止蒸发

　　显色时间过长可能导致假阳性，需严格控制

　　干扰因素：高脂样本需离心处理，类风湿因子可能影响结果，建议稀释后复测

　　注：以上仅供参考，科研使用，不作为实际数据，实验需严格遵循说明或咨询技术老师。

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