小鼠磷酯酶Cγ链(PLCγ1)ELISA试剂盒实验使用说明书

　　小鼠磷酯酶Cγ链(PLCγ1)ELISA试剂盒实验使用说明书

　　BS-9274 小鼠磷酯酶Cγ链(PLCγ1)ELISA试剂盒

　　一、产品概述

　　检测原理

　　采用双抗体夹心法，通过预包被抗小鼠PLCγ1抗体的微孔板捕获样本中的目标蛋白，再与HRP标记的检测抗体结合，形成“抗体-抗原-酶标抗体”复合物。经TMB显色后，450nm波长下测定吸光度(OD值)，浓度与OD值呈正相关。

　　性能指标

　　灵敏度：<0.156 ng/mL

　　检测范围：0.156-10 ng/mL

　　重复性：板内/板间变异系数<10%

　　二、试剂盒组成

　　组分规格(96T)存储条件

　　预包被酶标板8×12条2-8℃(避光)

　　标准品6管(0.156-10 ng/mL)-20℃(避免反复冻融)

　　检测抗体-HRP10 mL4℃

　　20×洗涤缓冲液25 mL室温

　　TMB显色液(A/B)各6 mL4℃(避光)

　　终止液6 mL室温

　　三、实验步骤

　　样本准备

　　血清/血浆：使用EDTA抗凝管采集，避免溶血，2-8℃保存48小时或-80℃长期保存。

　　组织匀浆：按1:9比例加入裂解缓冲液，冰上匀浆后离心取上清。

　　标准品稀释

　　取7支EP管，标注1/2至1/64梯度，按倍比稀释法配制标准曲线(示例：200μL标准品+200μL稀释液混匀后转移至下一管) 。

　　检测流程

　　加样：每孔加入100μL标准品/样本，37℃孵育90分钟。

　　洗涤：弃去液体，每孔加入350μL 1×洗涤液，静置30秒后拍干，重复3次。

　　显色：加入100μL TMB底物，避光孵育15分钟，加入50μL终止液。

　　测定：30分钟内用酶标仪读取450nm OD值。

　　四、注意事项

　　试剂平衡：使用前需将试剂盒室温平衡60分钟，避免冷凝水影响结果。

　　移液精度：使用校准后的移液器，避免交叉污染。

　　数据异常处理：若标准曲线R²<0.99，需检查稀释准确性或更换批次试剂。

　　五、结果计算

　　以标准品浓度为横坐标，OD值为纵坐标绘制四参数拟合曲线。

　　样本浓度通过曲线方程计算，若超出检测范围需重新稀释。

　　六、常见问题

　　高背景：可能因洗涤不彻底或底物污染，需检查洗涤步骤及试剂有效期。

　　复孔差异大：确保加样速度一致，样本充分混匀。

　　注意：以上仅供参考，不作为实际数据，实验需严格遵循说明或咨询技术老师。

　　小鼠磷酯酶Cγ链(PLCγ1)ELISA试剂盒实验使用说明书 本生一直视质量控制为企业的生命，追求企业竞争力的不断提升。公司在经营中始终秉承：遵纪守法，严于律己，宽仁以待，敢于承担的企业精神作为标准，以过硬的质量和优良的服务来维护和拓展市场，较大限度的满足客户的需求。与客户的共赢，是我们的发展目标，本生，您信任的合作伙伴!本生试剂盒