人细胞间粘附分子1(ICAM-1CD54)ELISA试剂盒使用说明书

　　人细胞间粘附分子1(ICAM-1CD54)ELISA试剂盒使用说明书

　　一、产品概述

　　本试剂盒采用双抗体夹心法，用于定量检测血清、血浆、细胞培养上清等样本中的人细胞间粘附分子1(ICAM-1/CD54)水平。ICAM-1/CD54是免疫球蛋白超家族成员，在炎症反应、免疫应答及心血管疾病中具有重要作用‌12。

　　二、检测原理

　　包被抗体：微孔板预先包被抗ICAM-1/CD54单克隆抗体

　　样本孵育：样本中的ICAM-1/CD54与包被抗体结合

　　酶标抗体：加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体

　　显色反应：加入TMB底物显色，颜色深浅与ICAM-1/CD54浓度呈正相关

　　终止反应：加入终止液终止反应

　　检测：450nm波长测定吸光度(OD值)，通过标准曲线计算浓度‌34三、试剂盒组成

　　组分规格保存条件

　　包被抗体微孔板96孔2-8℃

　　标准品(冻干)4000pg/mL-20℃

　　样本稀释液50mL室温

　　酶标抗体(HRP标记)10mL-20℃

　　TMB显色液12mL2-8℃避光

　　终止液6mL室温

　　洗涤液(20×)30mL室温

　　四、样本处理

　　‌血清样本‌：

　　室温静置10-20分钟，2000-3000转/分离心20分钟

　　收集上清，避免溶血样本

　　短期保存(≤1周)：2-8℃;长期保存：-20℃避免反复冻融‌5‌血浆样本‌：

　　使用EDTA或肝素抗凝管采集

　　混合后立即离心(2000-3000转/分，20分钟)

　　注意事项：避免使用含NaN3的样本‌5‌细胞培养上清‌：

　　离心去除细胞碎片

　　直接检测或适当稀释

　　五、实验步骤

　　‌试剂准备‌：

　　洗涤液：用去离子水将20×浓缩液稀释至1×

　　标准品梯度稀释：用样本稀释液稀释至2000-0pg/mL系列浓度

　　酶标抗体工作液：按说明书比例稀释

　　‌操作流程‌：

　　textCopy Code加样(100μL/孔) → 37℃孵育90分钟 → 洗涤4次

　　加酶标抗体(100μL/孔) → 37℃孵育60分钟 → 洗涤4次

　　加TMB显色液(100μL/孔) → 避光显色15-20分钟

　　加终止液(50μL/孔) → 10分钟内测定OD值

　　六、结果计算

　　以标准品浓度为横坐标，OD值为纵坐标绘制标准曲线

　　根据样本OD值在标准曲线上查得对应浓度

　　若样本浓度超过标准曲线范围，需适当稀释后重测

　　七、注意事项

　　实验前所有试剂需平衡至室温

　　避免试剂间交叉污染，使用一次性枪头

　　显色反应时间需严格控制，避免过度显色

　　酶标仪需提前预热，建议使用双波长(450/630nm)检测

　　本产品仅用于科研，不用于临床诊断‌4八、技术参数

　　检测范围：15.6-1000pg/mL

　　灵敏度：≤3.2pg/mL

　　批内精密度：CV<10%

　　批间精密度：CV<12%‌6九、储存条件

　　未开封试剂盒：2-8℃保存，有效期12个月

　　开封后组分：按说明书要求分别保存

　　人细胞间粘附分子1(ICAM-1CD54)ELISA试剂盒使用说明书 本生一直视质量控制为企业的生命，追求企业竞争力的不断提升。公司在经营中始终秉承：遵纪守法，严于律己，宽仁以待，敢于承担的企业精神作为标准，以过硬的质量和优良的服务来维护和拓展市场，较大限度的满足客户的需求。与客户的共赢，是我们的发展目标，本生，您信任的合作伙伴!本生试剂盒