大鼠三碘甲状腺原氨酸(T3)ELISA试剂盒实验使用说明书

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　　大鼠三碘甲状腺原氨酸(T3)ELISA试剂盒实验使用说明书如下：

　　实验原理‌

　　本试剂盒采用双抗体夹心法测定大鼠血清、血浆及相关液体样本中的三碘甲状腺原氨酸(T3)含量。首先用纯化的大鼠T3抗体包被微孔板，形成固相抗体。随后依次加入待测样本中的T3和HRP标记的T3抗体，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物。洗涤后加入底物TMB显色，TMB在HRP酶的催化下转化为蓝色，并在酸的作用下转化为黄色。颜色的深浅与样品中的T3浓度呈正相关，通过酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值)，并利用标准曲线计算样品中T3的浓度‌。

　　BS-3457  大鼠三碘甲状腺原氨酸(T3)ELISA试剂盒  96T/48T

　　试剂盒组成‌

　　30倍浓缩洗涤液‌：20ml×1瓶

　　酶标试剂‌：6ml×1瓶

　　酶标包被板‌：1块(96孔)

　　标准品(240ng/ml)‌：1瓶

　　显色液A‌：1瓶

　　显色液B‌：1瓶

　　终止液‌：6ml×1瓶

　　说明书‌：1份‌。

　　实验步骤‌

　　样本准备‌：将大鼠血清或血浆样本离心后取上清液，避免溶血或脂血‌。

　　加样‌：依次向包被板孔中加入标准品、质控品和待测样本，每孔50μL‌。

　　孵育‌：37℃孵育30分钟，洗涤5次‌。

　　加酶标试剂‌：每孔加入50μL HRP标记的T3抗体，37℃孵育30分钟，洗涤5次‌。

　　显色‌：每孔加入50μL显色液A和50μL显色液B，避光反应15分钟‌。

　　终止反应‌：每孔加入50μL终止液，轻轻混匀‌。

　　测定‌：使用酶标仪在450nm波长下测定各孔OD值‌。

　　结果计算‌

　　绘制标准曲线‌：以标准品浓度为横坐标，OD值为纵坐标，绘制标准曲线‌。

　　计算样本浓度‌：根据样本OD值，从标准曲线中查得对应的T3浓度‌。

　　注意事项‌

　　试剂保存‌：未开封试剂盒保存于2-8℃，开封后酶标板需密封保存于-20℃‌。

　　操作规范‌：避免交叉污染，使用一次性吸头，洗涤彻底‌。

　　样本处理‌：避免反复冻融样本，确保样本新鲜‌。

　　实验环境‌：保持实验室温度、湿度稳定，避免强光直射‌。

　　适用范围‌

　　本试剂盒适用于定量测定大鼠血清、血浆及相关液体样本中的三碘甲状腺原氨酸(T3)含量，用于甲状腺功能相关研究‌。

　　技术参数‌

　　检测范围‌：4ng/ml-120ng/ml‌。

　　最低检测限‌：47.4pg/mL‌。

　　保质期‌：12个月‌。

　　以上为大鼠三碘甲状腺原氨酸(T3)ELISA试剂盒的详细使用说明，实验操作需严格按照说明书进行，以确保结果的准确性和可靠性‌。