小鼠可溶性肌球蛋白重链2(sMHC-2)ELISA试剂盒实验使用说明书

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　　以下是关于小鼠可溶性肌球蛋白重链2(sMHC-2)ELISA试剂盒的实验使用说明：

　　BS-2216   小鼠可溶性肌球蛋白重链2(sMHC-2)ELISA试剂盒

　　一、实验原理

　　采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。预先包被sMHC-2捕获抗体的微孔中依次加入标本、标准品和HRP标记检测抗体，经温育洗涤后，通过TMB显色反应测定吸光度(OD值)，颜色深浅与sMHC-2浓度呈正相关‌。

　　二、试剂盒组成

　　微孔酶标板‌：预包被抗体(96孔或48孔配置)

　　标准品‌：浓度梯度溶液(通常0.3mL×6管)

　　检测抗体-HRP‌：辣根过氧化物酶标记物(10mL/5mL)

　　洗涤缓冲液‌：20×浓缩液需稀释使用‌

　　显色液‌：底物A/B各3-6mL‌

　　终止液‌：酸性溶液(6mL/3mL)‌

　　三、样本处理

　　血清‌：血液离心1000-3000×g 10分钟，避免溶血‌;

　　血浆‌：EDTA/肝素抗凝，离心后取上清‌;

　　组织匀浆‌：按1:9比例加PBS匀浆，3000×g离心10分钟‌;

　　保存‌：分装冻存于-20℃，避免反复冻融‌。

　　四、操作步骤

　　平衡‌：取出板条室温平衡20分钟，剩余板条密封4℃保存‌;

　　加样‌：

　　空白孔：不加样

　　标准品孔：50μL不同浓度标准品

　　样本孔：50μL待测样本‌;

　　孵育‌：加入HRP检测抗体100μL，37℃孵育60分钟‌;

　　洗涤‌：用洗涤液洗板5次，拍干‌;

　　显色‌：每孔加底物A/B各50μL，37℃避光反应15分钟‌;

　　终止‌：加终止液50μL，15分钟内测450nm OD值‌。

　　五、注意事项

　　有效期‌：未开封试剂盒通常6个月(2-8℃保存)‌;

　　线性范围‌：需按说明书标曲浓度操作，超出范围可能导致误差‌;

　　应用限制‌：仅限科研使用，不可用于临床诊断‌。

　　如需具体品牌试剂盒的完整说明书，可参考厂商提供的详细文档(如本生BS-2216或天正信达TZXD-2216‌)。