人触珠蛋白相关蛋白（HPR）ELISA试剂盒实验使用说明书

　　以下是关于‌人触珠蛋白相关蛋白(HPR)ELISA试剂盒‌的实验使用说明，综合整理自多份高可信度操作手册及技术文档‌：

　　BS-1737 人触珠蛋白相关蛋白(HPR)ELISA试剂盒

　　一、检测原理‌

　　采用‌双抗体夹心法‌：

　　抗HPR单抗预包被于酶标板，样本中的HPR与单抗结合‌。

　　加入生物素化抗HPR抗体形成复合物，洗涤后结合辣根过氧化物酶标记链霉亲和素‌。

　　加入TMB显色底物，OD450nm吸光度值与HPR浓度呈正比，通过标准曲线定量‌。

　　二、试剂盒组成‌

　　组分 规格(96T) 保存条件

　　预包被酶标板 8×12孔 4℃/-20℃干燥

　　冻干标准品 2支(2000pg/ml) -20℃

　　生物素化抗体 120μL 4℃(避光)

　　TMB显色液 A/B液各6mL 4℃(避光)

　　终止液(2M硫酸) 6mL 室温避光

　　20×浓缩洗涤液 50mL 室温

　　注：不同品牌组分可能略有差异，需核对实际包装‌。

　　三、样本处理‌

　　血清/血浆‌：

　　全血室温静置2小时或4℃过夜，1000×g离心20分钟取上清‌。

　　避免溶血或高血脂样本‌。

　　组织匀浆‌：

　　用预冷PBS(pH7.4)冲洗组织，按1:9(重量/体积)匀浆后离心取上清‌。

　　细胞培养上清‌：

　　1000×g离心20分钟去除碎片‌。

　　保存条件‌：

　　短期(1周内)可4℃保存，长期需分装冻存于-20℃或-80℃，避免反复冻融‌。

　　四、操作步骤‌

　　试剂准备‌：

　　标准品：用400μL蒸馏水复溶，梯度稀释(建议做复孔)‌。

　　洗涤液：20×浓缩液按1:20稀释‌。

　　加样与孵育‌：

　　每孔加入50μL标准品或样本，室温孵育2小时‌。

　　显色与终止‌：

　　加入TMB底物避光显色10-15分钟，终止后30分钟内检测OD值‌。

　　五、注意事项‌

　　避免酶标板底部接触，影响读数准确性‌。

　　不同批号试剂不可混用，未用完板条需密封防潮‌。

　　终止液含强酸，操作时需佩戴防护用具‌。

　　注：以上资料仅供参考，如需进一步技术细节或问题排查，可参考具体品牌说明书或联系供应商‌。

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