知识大汇总——细胞培养常见问题

　　天津本生 知识大汇总——细胞培养常见问题
 

　　1、血清的保质期?

　　血清在-10～-30℃冷冻的条件下可保存五年，化冻后置于2～8℃环境中建议在两周内使用完。若一次无法用完一瓶，建议将血清无菌分装并冷冻。

　　2、血清如何解冻?

　　血清解冻需采用逐步解冻法:

　　将血清从-20℃冰箱放入4℃冰箱中溶解一天，然后移入室温，待全部溶解后再分装。在溶解过程中需不断轻轻摇晃均匀(小心勿造成气泡)，减少沉淀生成。不应直接将血清从-20℃转入37℃解冻，因温差较大，易造成蛋白质凝结并出现沉淀。

　　3、换血清后如何让细胞适应新的培养条件?

　　应采取逐步替换的过程：通过1：2、1：1、2：1，最后用新的培养基完全替换。该过程中最好保留一瓶完全由最初的培养基培养的细胞，防止细胞适应失败，降低风险。

　　4、我收到血清后血清已经融化了，还能用吗?

　　如果血清轻微融化，或者收到后液体温度还是冰冰凉的，那么这种情况对于使用是没有任何影响的，如果已经处于室温状态超过24小时，不建议使用了，因为可能会产生微生物污染

　　5.培养基中添加了血清和抗生素后，可长期保存吗 ?

　　一旦您在新鲜培养基中添加了血清和抗生素时，您应该在2周内使用它。因为一些抗生素和血清中的基本成分在解冻后就开始降解。

　　培养细胞死亡可能的原因：

　　(1)pH不适宜

　　(2)培养箱内温度波动太大

　　(3)细胞冻存或复苏过程中损伤

　　(4)培养液渗透压不正确

　　(5)培养液中有毒代谢产物堆积

　　(6)胰蛋白酶消化过度

　　(7)微生物污染

　　细胞老化建议解决方法：

　　(1)检查培养箱内C02是否符合培养要求，调整培养基pH值

　　(2)检查培养箱内温度，尽量选择水套式培养箱，保证稳定的培养温度

　　(3)规范冻存、复苏流程，取新的保存细胞，建立细胞种子库和工作库，及时冻存状态较好胞

　　(4)检测培养液渗透压

　　(5)及时更换新鲜培养液

　　(6)缩短消化时间或降低胰蛋白酶浓度

　　(7)重新复苏细胞，规定细胞使用代次

　　细胞培养 本生一直视质量控制为企业的生命，追求企业竞争力的不断提升。公司在经营中始终秉承：遵纪守法，严于律己，宽仁以待，敢于承担的企业精神作为标准，以过硬的质量和优良的服务来维护和拓展市场，较大限度的满足客户的需求。与客户的共赢，是我们的发展目标。本生!您信任的合作伙伴。我们愿与您真诚合作，共创美好的未来。