本生快讯：ELISA实验样本的选择—血清/血浆
 

　　好多实验朋友在准备采血做ELISA的时候都会有这样的疑问—我检测的指标是用血清，还是血浆好?本生技术就来带大家了解一下ELISA检测使用血清和血浆的差异。

　　血清和血浆的区别

　　人的血液由血浆和血细胞组成。血浆的成分主要包含水、蛋白质、葡萄糖、无机盐。血细胞包含红细胞、白细胞、血小板。

　　1、血液中如果加入抗凝剂，所获得的不含血细胞成分的液体，即血浆。血浆中不含一些凝血过程中血小板释放的物质。

　　2、若血液中不加抗凝剂，则血小板释放的凝血物质会和血浆中的凝血素以及纤维蛋白原结合形成纤维蛋白，纤维蛋白很快地凝固形成凝血kuai，经血凝块聚缩释出的液体，即血清。血清中不含纤维蛋白原和某些凝血因子、无参与凝血的血浆蛋白。

　　在检测中样本的选择

　　1、全血多用于血细胞、血常规、血沉等方面的检测;

　　2、血清多用于血液生化、免疫等方面的检测;

　　3、血浆多用于凝血等方面的检测;

　　4、血清的凝血过程可能会与药物产生吸附作用，从而减少血清的含量，造成实验中的误差;

　　5、血浆中含有抗凝物质(EDTA或肝素)，可能干扰化合物的结合或检测，如果要收集血浆，抗凝剂的种类应根据具体的实验要求进行选择。

　　血清&血浆样本的制备方法

　　血清样本的制备

　　1、使用无热原、无内毒素的试管或离心管采集血液样本，将试管或离心管在室温下放置1小时或2~8℃过夜，分离出血清;

　　2、2~8℃条件下，以1000×g离心20分钟，小心收集上清液(血清)。

　　血浆样本的制备

　　1、使用含抗凝剂的采血管或离心管采集血液样本;

　　2、采集后30分钟内，2-8℃条件下，以1000×g离心15分钟，小心收集上清液(血浆);

　　3、常见的抗凝剂包括：EDTA钠盐，肝素钠，枸橼酸钠等，ELISA实验中，通常推荐EDTA盐(EDTA二钠盐或EDTA二钾盐)作为抗凝剂。

　　检测前请仔细阅读ELISA试剂盒说明书，查看该试剂盒针对抗凝剂是否有特殊要求。

　　注：在收集血液样本的过程中应避免溶血，因为红细胞在溶解时会释放具有过氧化物酶活性的物质，这种情况下，ELISA实验中将会出现非特异性显色反应，导致检测结果不准确。另外，样本还应避免细菌污染，因为细菌可能含有内源性HRP，也会导致检测结果不准确。

　　注：所有血清、血浆样本收集完成后，应及时分装放在-20℃或-70℃条件下保存，避免反复冻融。如果在24小时内检测，样本可以存放在2~8℃。在分析前，冷冻样本应该缓慢的恢复至室温，轻柔地混匀。如果保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。

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