改良Movat五色套染试剂盒操作步骤及注意事项

　　改良Movat五色套染试剂盒操作步骤及注意事项

　　一、Russell改良Movat五色套染试剂盒简介

　　弹力纤维呈黑色,胶原蛋白、网状纤维呈黄色,背景呈蓝色,纤维素呈深红色,肌肉呈红色。弹力纤维分化一般2-4分钟。主要由阿利新蓝染液、苏木素溶液、氯化t、硫代硫酸钠、藏红花等组成。结缔组织狭义上是指其含有的三种纤维：胶原纤维、网状纤维、弹力纤维。结缔组织染色方法亦有很多种，如Masson三色染色法、Van Gieson染色法、Gomori氨银法、Mallory磷钨酸苏木素染色，然而以上染色方法只是侧重于某一两种组织的染色。

　　改良Movat五色套染以其染色丰富、鲜艳而大受欢迎。该染色法主要用于显示动脉粥样硬化斑块。Weigert苏木素用于染细胞核，藏红品红用于染细胞质，藏红花染胶原组织，阿尔辛蓝染基质(蛋白聚糖)。由于该试剂盒操作过程复杂，其染色效果跟操作者经验和数量程度有很大关系，所以同时染出十分满意的结果并不容易。

　　操作步骤‌：

　　‌石蜡切片脱蜡至水‌

　　依次将切片放入二jiaben、无水乙醇、75%酒精中，进行脱蜡和水化处理‌。

　　‌染色处理‌

　　使用试剂盒中的A液(可能是阿利新蓝染液等)进行染色，时间根据说明书调整，一般为20分钟左右‌。

　　接着进行碱性乙醇分化、苏木素染色、品红染色、磷钨酸处理、藏红花染色等步骤，每步之间需充分冲洗‌。

　　‌分化与冲洗‌

　　在某些染色步骤后，需要进行分化处理，以去除多余染液，然后用蒸馏水或自来水冲洗‌。

　　‌封片与镜检‌

　　最后，用二jiaben进行透明处理，中性树胶封片，然后在显微镜下观察染色结果‌

　　二、改良Movat五色套染色试剂盒操作步骤及注意事项：

　　1、 石蜡切片脱蜡至蒸馏水。

　　2、 试剂盒 A 液 20 分钟。

　　3、 流水冲洗 5 分钟。

　　4、 试剂盒 B 液 1 小时。

　　5、 流水冲洗 20 分钟。

　　6、 蒸馏水稍洗。

　　7、 试剂盒 C 液 15 分钟。

　　8、 蒸馏水冲洗多次。

　　9、 试剂盒 D 液分化，至弹力纤维与背景对比鲜明。

　　10、 蒸馏水稍洗。

　　11、 试剂盒 E 液 1 分钟。

　　12、 流水冲洗 5 分钟，蒸馏水稍洗。

　　13、 试剂盒 F 液 1～5 分钟。

　　14、 蒸馏水中洗几次。

　　15、 0.5%的醋酸稍洗。

　　16、 试剂盒 G 液 2 次，每次 5 分钟。

　　17、 0.5%的醋酸稍洗。

　　18、 *速洗 3 次。

　　19、 试剂盒 H 液 15 分钟。

　　20、 *快洗，3 次。

　　21、 二甲b透明 2～3 次，人工树脂封片。

　　注意事项：

　　弹力纤维分化通常在 2～3 分钟内完成。流水充分冲洗以除去试剂盒 B 液是非常重要的。 若冲洗失败会抑制后续的染色步骤。这种染色法可显示新型隐球菌，将其染成亮蓝色。

　　保存条件： 4℃,避光,12 个月

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