超敏化学发光底物检测试剂盒产品资料

　　超敏化学发光底物检测试剂盒产品资料
 

　　产品简介:

　　3-氨基邻苯二甲酷阱是一种较强的化学发光物质，在存在辣根过氧化酶催化的条件下，可以被氧分子氧化成具有发光现象的中间体，当中间体从激发态衰变到基态时可以产生明亮的化学荧光，常用于检测固定在膜上的蛋白质等生物大分子。其高灵敏度能够检测po级别的抗原，发光信号强烈持久，可以使用照相技术(X-光胶片曝光) 或者其他成像方法检测。

　　保存条件:

　　避光2-8°C保存.一年有效。

　　操作流程:

　　1、转印膜及试剂准备

　　1.1常规电泳、转膜、HRP标记抗体或核酸探针孵育、洗膜。1.2洗涤膜上的 HRP 标记二抗时，新鲜配制发光工作液: 分别取等体积的溶液 A 和 B 混合，放置使之升到室温，否则会减弱荧光强度。建议立即使用工作液，室温放置数小时后仍可使用但灵敏度略有降低。

　　2、孵育及曝光

　　2.1用镊子取出膜，搭在滤纸上沥干洗液但勿使膜完全干燥。将膜完全浸入并与发光工作液充分接触(约0.125ml/cm~膜)。室温孵育 3-5分钟，准备立即压片曝光。孵育时间过长不会增加灵敏度，有时还会导致曝光条带异常。发光过程的本质是酶促反应，使用过少的发光工作液不利反应进行，也会导致膜上条带曝光不均和明显降低灵敏度。为达节约目的可将膜剪小但勿降低发光液用量。2.2用镊子夹起膜，搭在滤纸上沥干发光工作液。2.3在X 光胶片暗盒内面铺一张面积大于膜的保鲜膜。将杂交膜贴在保鲜膜上，将保鲜膜折起来完全包裹杂交膜，去除气泡和皱褶，可剪去边缘部多余的保鲜膜。用滤纸吸去多余的发光工作液。用胶带将覆盖杂交膜的保鲜膜固定在暗盒内，最好蛋白带面向上。2.4在黑暗中放入X光胶片，分别曝光不同的时间如数秒到数分钟。显影冲洗。

　　注意事项:

　　1、为获得最佳实验结果，请务必优化实验条件，包括检测样品的用量、一抗、二抗稀释度以及杂交膜及封闭试剂的选择;

　　2、由于牛奶中含有内源性生物素，在使用亲和素/生物素系统时，封闭液中请避免使用奶粉;

　　3、在封闭缓冲液及所有抗体稀释液中加入高质量的吐温-20(终浓度为0.05% )，以减少非特异性结台;

　　4、整个免疫印迹实验过程应确保印迹膜始终处于湿润状态，避免干燥;

　　5、为获得最佳实验效果，抗体孵育及膜洗涤步骤中请使用摇床辅助完成;

　　6、在膜操作过程中请带手套操作或者使用干净的镊子，避免蛋白污染;

　　7、实验过程中，请使用干净的器材。保证非金属设备没有明显划痕，金属设备表面无锈。锈可能导致膜上带有污点或者高背景;

　　8、避光条件下，配制好的化学发光检测底物工作液可在室温下稳定8小时。如暴露于阳光或其他强光下工作液会受影响。为获得最佳效果，可于棕色瓶中配制工作液，避免强光长时间的照射。正常实验室灯光短时间照射不影响工作液的使用;

　　9、蛋白过量或长时间曝光，将加深背景并使条带强弱变化失去线性关系。曝光不足则条带模糊;

　　10、发光工作液孵育约3分钟后膜上的条带发光。强条带发光在暗房中肉眼可见，低丰度蛋白条带发光较弱甚至肉眼不可见但可使X光胶片曝光。不能简单以肉眼观察判断条带发光时间。肉眼不可见的荧光实际上可持续数小时并使X光胶片感光，因而弱带可曝光1-10小时。如果曝光后条带不佳，可用洗膜缓冲液洗膜，重新孵育二抗，然后重新用ECL发光和曝光:
　　11、某些市售保鲜膜包裹印迹膜时会淬灭荧光，应选择高质量保鲜膜；

　　温馨提示:

　　为了您的自身安全，使用试剂前，请做好防护，如穿实验服，带手套等;

　　超敏化学发光底物检测试剂盒 本生一直视质量控制为企业的生命，追求企业竞争力的不断提升。公司在经营中始终秉承：遵纪守法，严于律己，宽仁以待，敢于承担的企业精神作为标准，以过硬的质量和优良的服务来维护和拓展市场，较大限度的满足客户的需求。与客户的共赢，是我们的发展目标。本生!您信任的合作伙伴。我们愿与您真诚合作，共创美好的未来。

　　标签：超敏化学发光底物 检测试剂盒 试剂盒 本生试剂盒 缓冲液 抗体