细胞培养的污染处理及预防方法

　　细胞污染后的处理

　　细胞一旦发现有污染出现，应及时对所用试剂和耗材进行清理。耗材可更换新的或者重新高压灭菌，试剂可重新过滤除菌或者更换新批次，操作台和细胞房需用消毒液进行全面清洁消杀后方可复苏新的细胞，以免反复出现污染。

　　污染防治策略

　　1、细胞房环境控制

　　环境要求：洁净区10000级，局部100级，定期进行沉降菌检测

　　环境消毒：每周一次定期消毒灭菌

　　1) 地面/墙面：84消毒液、新洁尔灭交叉使用

　　2) 环境消毒：定期紫外照射，臭氧熏蒸

　　3) 仪器设备表面：75%酒精擦拭

　　2、实验人员管理

　　着装：着连体衣，戴口罩、手套，头发、手腕等要包好，减少皮肤外露。

　　行为：减少走动，出入关门，操作时不要讲话。

　　技能：养成良好的无菌操作习惯。

　　其他：减少共用物品，公共使用区域统一使用习惯，区分洁净区域和有风险的区域。

　　3、 实验用品管理

　　试剂：使用前确保无菌，自己配制的试剂需过滤除菌后再使用。

　　耗材：需要重复使用的耗材确保按照规定清洗、高温高压灭菌，使用灭菌指示带。灭菌后烘干的耗材立刻放进超净台，一周内使用完毕，未使用完的，需重新灭菌再使用。

　　仪器设备：定期擦拭消毒，培养箱、显微镜托盘等高风险区域需经常清洁，培养箱水盘和复苏用的水浴锅需添加抑菌剂。

　　其他：当出现培养物泄漏时，应及时清理干净;出现局部污染时，应找出污染源并对环境整体消毒。

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