ELISA实验成败关键：温育环节的要点与优化

　　ELISA试剂盒试验需求留意温育问题

 

　　‌ELISA试剂盒试验中温育问题的核心注意事项‌：温育是ELISA测定中最容易出现问题的步骤，必须保证在设定的温度下有足够的反应时间。温育所需时间与温度成反比，即温度越高，所需时间相对较短。通常国内ELISA试剂盒的反应温育时间为37℃ 30分钟至1小时，而进口ELISA试剂盒则需要37℃ 1至2小时才能有较完全的结合，低于1小时可能会影响测定下限‌12。

　　ELISA试验中影响测定胜败*为关键的一个要素,那就是温育。ELISA作为一种固相免疫测定，抗原抗体的结合反应在固相上进行，假如要让液相中的抗原或抗体与固相上的特异抗体或抗原结合，需求在一定的温度条件下反应一定的时刻。本公司提醒您，在运用elisa试剂盒进行试验时，需求留意温育问题。

　　一些操作者，擅自改变说明书操作，运用自己喜欢的温育时刻和温育温度，这样形成一些不必要的费事。由于，不同试剂盒有不同的温育时刻和温育温度的选择，随意更改温育时刻或许温育温度将导致试验结果出现偏差。

　　‌温育时间的选择‌：温育时间的选择对实验结果有重要影响。国内ELISA试剂盒的温育时间一般为37℃ 30分钟至1小时，而进口试剂盒则需要1至2小时。温度低于37℃或时间不足都可能导致结合不完全，影响测定结果的准确性‌。

　　‌温育温度的选择‌：常用的温育温度有37℃、43℃和室温等。37℃是实验室中常用的保温温度，适合大多数抗原抗体结合反应。温度越高，反应时间相对较短，但不应超过43℃，以免影响反应特异性‌。

　　‌温育方式的选择‌：温育方式有水浴法、湿盒法和微波辐射法等。水浴法能较好地解决受热不均衡的问题，避免边缘效应;湿盒法适用于室温较低时的保温，但需注意避免水汽影响读数;微波辐射法则需谨慎使用，以免影响实验结果‌1测定。

　　保温方式：ELISA仪器附有特制的电热块，水浴。 温育所需时刻与温度成反比，即温度越高，则所需时刻相对较短。为常用的温育温度有37℃和室温，其次是43℃和2～8℃。

　　若用保温箱：ELISA板放在湿盒内，在盒底垫湿的纱布，*后将ELISA板放在湿纱布上。反应板均不宜叠放，以确保各板的温度都能迅速平衡。

　　室温温育的反应，操作时的室温应严格约束在规定的范围内，规范室温温度是指20-25℃，但具体操作时可根据说明书的要求操控温育。应留意温育的温度和时刻应按规定力求准确。为确保这一点，一个人操作时，一次不宜多于两块板一起

　　‌实际操作中的注意事项‌：在实际操作中，需确保微孔板在转入温箱后达到设定温度后再开始计时，特别是在室温较低时。此外，不同试剂盒有不同的温育时间和温度要求，操作时应严格遵守说明书指示，避免随意更改导致结果偏差‌。

　　注：本试剂盒仅供科研使用，不用于临床诊断。具体操作请以实际试剂盒说明书为准。

　　ELISA试剂盒本生一直视质量控制为企业的生命，追求企业竞争力的不断提升。公司在经营中始终秉承：遵纪守法，严于律己，宽仁以待，敢于承担的企业精神作为标准，以过硬的质量和优良的服务来维护和拓展市场，较大限度的满足客户的需求。与客户的共赢，是我们的发展目标。本生!您信任的合作伙伴。我们愿与您真诚合作，共创美好的未来。