ELISA试剂盒样本内源性干扰因素介绍

 

　　内源性干扰因素，包括类风湿因子、补体、高浓度的非特异免疫球蛋白、异嗜性抗体、某些自身抗体等。

　　1、类风湿因子在类风湿患者及正常人血清中，常含有较高或不同浓度的类风湿因子(RF)，其一般为IgM型，亦有IgG和IgA型，具有与变性IgG产生非特异结合的特点，因为在ELISA测定中，其可与固相上包被的特异抗体IgG以及随后加入的酶标的特异抗体IgG结合，从而出现假阳性结果。避免其发生的方法有：

　　① 用F(ab)2替代完整的IgG。

　　② 标本用联有热变性IgG的固相吸附剂处理。

　　③ 检测抗原时，可用2-巯基yi醇加入到标本稀释液中使RF降解。

　　2、补体在固相酶免疫测定中，来自哺乳动物的固相抗体和酶标二抗均有激活人补体系统的功能。一方面，固相抗体和酶标二抗可因其吸附及结合过程中抗体分子发生变构，使Fc段的补体C1q结合点暴露出来，使C1q成为一个中介物将二者交联起来出现假阳性结果。另一方面，固相抗体也会因为活化补体的结合，封闭抗体和抗原的表位结合能力而引起假阴性。解决的办法是：

　　① 用EDTA稀释标本。

　　② 56℃ 30 min加热血清使C1q灭活。

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