小鼠白介素30(IL-30)ELISA试剂盒实验原理

    小鼠白介素30(IL-30)ELISA试剂盒技术说明书
    产品概述
    本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附技术，用于体外定量检测小鼠血清、血浆、细胞裂解液及细胞培养上清液中IL-30蛋白浓度。IL-30是IL-27的p28亚基，与EBV诱导基因3(EBI3)共同构成IL-27异二聚体，参与免疫细胞调控。
    检测原理
    预包被抗体：IL-30单克隆抗体预包被于酶标板孔中。
    样本孵育：样本中的IL-30与预包被抗体结合。
    检测抗体：加入生物素标记的IL-30多克隆抗体，形成“抗体-抗原-抗体”复合物。
    显色反应：加入辣根过氧化物酶标记的亲和素复合物，通过TMB底物显色，颜色深浅与IL-30浓度呈正相关。
    血清/血浆：使用无热原、无内毒素试管采集，避免溶血。室温凝固10-20分钟后离心(2000-3000转/分，20分钟)，取上清。样本可在2-8℃保存48小时，长期保存需-20℃或-80℃冷冻，避免反复冻融^^1^^。
    细胞培养上清：离心去除细胞碎片，直接检测或稀释后检测。
    组织匀浆：按组织重量加入适量生理盐水，机械匀浆后离心取上清。
    操作步骤
    标准品配制：将冻干标准品用样品稀释液复溶，梯度稀释为7个浓度点(如1000pg/mL、500pg/mL...15.6pg/mL)。
    加样：每孔加入100μL标准品或样本，37℃孵育90分钟。
    洗涤：弃去孔内液体，用洗涤缓冲液洗涤3次，拍干。
    加检测抗体：每孔加入100μL生物素标记抗体，37℃孵育60分钟。
    加酶标物：每孔加入100μL亲和素-过氧化物酶复合物，37℃孵育30分钟。
    显色：每孔加入90μLTMB显色液，避光室温孵育15-20分钟。
    终止：每孔加入50μL终止液，混匀。
    读数：立即用酶标仪在450nm波长测定吸光度(OD值)。
    结果计算
    以标准品浓度为横坐标，OD值为纵坐标绘制标准曲线。根据样本OD值，从标准曲线中计算出IL-30浓度。若样本OD值高于标准曲线最高点，需用样品稀释液稀释后重新测定。
    性能参数
    检测范围：15.6pg/mL-1000pg/mL
    灵敏度：<1pg/mL
    特异性：与IL-27、IL-31等其他细胞因子无交叉反应
    精密度：板内变异系数<10%，板间变异系数<15%
    注意事项
    试剂盒仅用于科研实验，不可用于临床诊断。
    不同批号试剂组分不可混用。
    使用前将所有试剂平衡至室温。
    避免使用含(NaN3)的样本，可能抑制酶活性。
    终止液为酸性溶液，避免接触皮肤和衣物。
    储存条件
    未开封试剂盒在2-8℃保存，有效期6个月。开封后酶标板需密封干燥保存，标准品需分装后-20℃保存，避免反复冻融。
    注：以上仅供参考，不作为实际数据，实验需严格遵循说明或咨询技术老师。
    小鼠白介素30(IL-30)ELISA试剂盒实验原理本生一直视质量控制为企业的生命，追求企业竞争力的不断提升。公司在经营中始终秉承：遵纪守法，严于律己，宽仁以待，敢于承担的企业精神作为标准，以过硬的质量和优良的服务来维护和拓展市场，较大限度的满足客户的需求。与客户的共赢，是我们的发展目标。本生!您信任的合作伙伴。我们愿与您真诚合作，共创美好的未来。