大鼠白介素9(IL-9)ELISA试剂盒实验使用说明书

　　大鼠白介素9(IL-9)ELISA试剂盒实验使用说明书

　　BS-3048 大鼠白介素9(IL-9)ELISA试剂盒

　　一、试剂盒组成与储存

　　主要组分

　　预包被微孔板(抗大鼠IL-9单克隆抗体)

　　标准品(冻干品，浓度100 ng/mL)

　　生物素化检测抗体

　　链霉亲和素-HRP酶结合物

　　TMB显色底物、终止液、20×洗涤缓冲液

　　储存条件

　　未开封试剂盒：2-8℃避光保存，有效期6个月。

　　已复溶标准品：需丢弃，不可重复使用。

　　二、实验操作步骤

　　样本准备

　　血清/血浆：避免溶血，离心后取上清液

　　细胞上清：3000×g离心10分钟去除颗粒物

　　组织匀浆：按1:9比例加入PBS匀浆后离心。

　　标准品稀释

　　每管标准品加0.5mL样本稀释液复溶，静置10分钟后涡旋混匀。

　　系列稀释范围：3.9-250 pg/mL(8点标准曲线)。

　　检测流程

　　步骤操作要点温度/时间

　　加样每孔100μL标准品/样本室温平衡后操作

　　孵育37℃避光孵育90分钟避免震动

　　洗涤洗板5次，拍干残留液体使用1×洗涤缓冲液

　　显色加入TMB避光反应15分钟室温

　　终止加入50μL终止液立即读数

　　三、关键性能参数

　　灵敏度：1.0 pg/mL(空白+3SD)。

　　检测范围：3.9-250 pg/mL(线性R²≥0.99)。

　　交叉反应：与大鼠IL-4、IL-13交叉反应<0.1%。

　　重复性：批内CV<6%，批间CV<10%。

　　四、注意事项

　　试剂使用前需平衡至室温(20-25℃) 。

　　避免金属移液器接触终止液和底物。显色反应后30分钟内完成450nm波长读数。

　　不同批次试剂不可混用。

　　注：以上资料仅供参考，不作为实验依据，具体产品资料请咨询技术老师或品牌供应商。

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