人组织因子途径抑制物(TFPI)ELISA试剂盒实验使用说明书

　　BS-0200人组织因子途径抑制物(TFPI)ELISA试剂盒

　　一、实验原理

　　采用双抗体夹心法：

　　包被阶段：微孔板预包被抗人TFPI单克隆抗体(固相抗体) 。结合阶段：样本中TFPI抗原与固相抗体结合，后加入生物素标记的二抗形成“抗体-抗原-酶标抗体”复合物。

　　显色阶段：加入TMB底物，HRP催化生成蓝色产物，终止液(2mol/L H₂SO₄)终止反应并转为黄色，450nm波长测OD值。

　　二、试剂盒组成

　　组分规格备注

　　酶标包被板12孔×8条预包被抗TFPI抗体

　　标准品0.5ml×1瓶含梯度浓度TFPI

　　生物素标记抗体6ml×1瓶避光保存

　　终止液6ml×1瓶2mol/L H₂SO₄

　　显色剂(A/B液)各6ml临用前等体积混合

　　三、样本处理规范

　　血清：全血室温凝固30min，2000×g离心20min，避免溶血。

　　血浆：肝素抗凝，2-8℃离心后需二次离心(10000×g 10min)去除血小板。

　　细胞裂解液：PBS洗涤后裂解，14000×g离心取上清。

　　四、操作步骤

　　加样：每孔加标准品/样本50μL，生物素抗体100μL，37℃孵育60min。

　　洗涤：洗板5次，拍干(避免孔内残留)。

　　显色：TMB避光孵育15min，终止液50μL/孔，立即测定OD值。

　　五、数据分析

　　标准曲线：以标准品浓度为横坐标，OD值为纵坐标，四参数拟合。

　　结果计算：样本OD值代入曲线方程，乘以稀释倍数(如需)。

　　六、注意事项

　　终止液安全：含强酸，操作时佩戴防护装备，避免接触皮肤。

　　时效性：加入终止液后需30分钟内完成检测，防止吸光度衰减。

　　质控要求：空白孔OD值应<0.1，否则提示试剂污染或操作失误。

　　注：以上资料仅供参考，不作为实验依据，如果其他具体信息请咨询技术老师或品牌供应商。

　　人组织因子途径抑制物(TFPI)ELISA试剂盒实验使用说明书 本生一直视质量控制为企业的生命，追求企业竞争力的不断提升。公司在经营中始终秉承：遵纪守法，严于律己，宽仁以待，敢于承担的企业精神作为标准，以过硬的质量和优良的服务来维护和拓展市场，较大限度的满足客户的需求。与客户的共赢，是我们的发展目标。本生!您信任的合作伙伴。我们愿与您真诚合作，共创美好的未来。本生试剂盒