小鼠α1抗凝乳蛋白(ACT)ELISA试剂盒实验使用说明书

　　‌‌小鼠α1抗凝乳蛋白(ACT)ELISA试剂盒实验使用说明书

　　BS-9367小鼠α1抗凝乳蛋白(ACT)ELISA试剂盒

　　1. 实验原理

　　本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)技术‌。将抗小鼠α1抗凝乳蛋白(ACT)抗体包被于微孔板中，加入样本后，样本中的ACT与包被抗体结合。再加入酶标记的检测抗体，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物。洗涤后加入底物TMB显色，颜色的深浅与样本中ACT的浓度成正比，通过酶标仪测定吸光度(OD值)计算样本浓度‌。

　　2. 试剂盒组成

　　组分 96孔配置 48孔配置

　　微孔酶标板 12孔×8条 12孔×4条

　　标准品 0.3mL×6管 0.3mL×6管

　　样本稀释液 6mL 3mL

　　检测抗体-HRP 10mL 5mL

　　20×洗涤缓冲液 25mL 15mL

　　底物TMB 9mL 4.5mL

　　终止液 9mL 4.5mL

　　封板膜 2张 2张

　　3. 样本收集与处理

　　3.1 血清样本

　　使用不含热原和内毒素的试管收集血液，室温静置30分钟，1000×g离心10分钟分离血清。

　　避免溶血，溶血样本可能影响检测结果。

　　3.2 血浆样本

　　使用EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝剂收集血液，1000×g离心30分钟分离血浆‌。

　　3.3 细胞上清液

　　1000×g离心10分钟去除细胞碎片和颗粒物‌。

　　3.4 组织匀浆

　　将组织加入适量生理盐水捣碎，1000×g离心10分钟取上清‌。

　　3.5 样本保存

　　新鲜样本若不立即检测，建议分装后-20℃或-80℃保存，避免反复冻融‌。

　　冻存样本使用前在室温下缓慢解冻并混匀‌。

　　4. 实验步骤

　　4.1 试剂准备

　　将20×洗涤缓冲液用蒸馏水稀释至1×工作液‌。

　　标准品梯度稀释：依次稀释为80、40、20、10、5、2.5 U/mL。

　　4.2 加样

　　将标准品和样本各50μL加入相应微孔中，每个样本设双孔‌。

　　37℃孵育30分钟。

　　4.3 洗涤

　　弃去孔内液体，每孔加入1×洗涤缓冲液300μL，浸泡1分钟，吸干或拍干，重复5次‌。

　　4.4 加酶标抗体

　　每孔加入检测抗体-HRP 100μL，37℃孵育30分钟‌。

　　4.5 洗涤

　　同步骤4.3。

　　4.6 显色

　　每孔加入底物TMB 90μL，37℃避光孵育15分钟‌。

　　4.7 终止反应

　　每孔加入终止液50μL，终止反应‌。

　　4.8 测定

　　用酶标仪在450nm波长下测定各孔OD值‌。

　　5. 结果计算

　　以标准品浓度为横坐标，OD值为纵坐标，绘制标准曲线。根据样本OD值从标准曲线中计算出样本浓度。若样本浓度高于标准曲线最高值，需用样本稀释液稀释后重新测定。

　　6. 注意事项

　　试剂盒保存于2-8℃，使用前室温平衡20分钟‌。

　　浓缩洗涤液如有结晶，需水浴加热溶解后使用‌。

　　实验中避免酶标板干燥，建议使用湿盒或密封袋保存‌。

　　加样时避免产生气泡，确保加样准确‌。

　　不同批号试剂盒组分不可混用‌。

　　终止液为酸性溶液，避免接触皮肤和眼睛‌。

　　7. 性能指标

　　灵敏度：≤0.5 U/mL

　　检测范围：2.5-80 U/mL

　　精密度：批内变异系数<10%，批间变异系数<15%

　　回收率：85%-110%

　　8. 有效期

　　6个月(2-8℃保存)。

　　本试剂盒仅供科研使用。

　　注：以上仅供参考，本试剂仅供科研使用，不作为实际数据，实验需严格遵循说明或咨询技术老师。

　　小鼠α1抗凝乳蛋白(ACT)ELISA试剂盒实验使用说明书 本生一直视质量控制为企业的生命，追求企业竞争力的不断提升。公司在经营中始终秉承：遵纪守法，严于律己，宽仁以待，敢于承担的企业精神作为标准，以过硬的质量和优良的服务来维护和拓展市场，较大限度的满足客户的需求。与客户的共赢，是我们的发展目标。本生!您信任的合作伙伴。我们愿与您真诚合作，共创美好的未来。本生试剂盒