大鼠糖化血红蛋白A1c(GHbA1c)ELISA试剂盒实验使用说明书

    大鼠糖化血红蛋白A1c(GHbA1c)ELISA试剂盒实验使用说明书
    BS-3384大鼠糖化血红蛋白A1c(GHbA1c)ELISA试剂盒
    一、实验原理‌
    本试剂盒采用‌双抗体夹心法‌检测大鼠血清/血浆中的糖化血红蛋白A1c（GHbA1c）。
    包被抗体‌：微孔板预包被抗大鼠GHbA1c单克隆抗体。
    检测抗体‌：HRP标记的抗大鼠GHbA1c抗体，与样本中抗原形成“抗体-抗原-酶标抗体”复合物。
    显色反应‌：TMB底物在HRP催化下显蓝色，终止液（稀硫酸）使颜色变黄，450nm波长测定吸光度（OD值），浓度与OD值正相关。
    二、试剂盒组成‌
    组分规格保存条件
    预包被微孔板96孔2-8℃避光
    标准品（S0-S5）0-400ng/mL-20℃（冻干粉）
    HRP标记检测抗体6mL2-8℃避光
    20×洗涤缓冲液20mL室温（结晶需水浴溶解）
    TMB显色液（A/B）各6mL2-8℃避光
    终止液（稀硫酸）6mL室温
    样本稀释液6mL2-8℃
    封板膜2张室温
    三、样本处理‌
    血清‌：
    血液室温静置10-20分钟，2000-3000×g离心20分钟，取上清。
    避免溶血，沉淀需再次离心。
    血浆‌：
    使用EDTA/柠檬酸钠抗凝，离心同上。
    尿液/细胞上清‌：
    无菌管收集，离心去沉淀，上清直接检测或稀释。
    保存‌：
    短期：2-8℃；长期：-20℃（避免反复冻融）。
    四、实验步骤‌
    标准品稀释‌：
    冻干标准品用标准稀释液复溶，梯度稀释至0-400ng/mL（S0-S5）。
    加样‌：
    每孔加100μL标准品/样本，37℃孵育90分钟。
    弃去液体，拍干，每孔加100μL检测抗体，37℃孵育60分钟。
    洗涤‌：
    每孔加350μL洗涤液，静置1分钟，甩干，重复5次。
    显色‌：
    每孔加TMB底物各50μL，37℃避光孵育15分钟。
    终止与读数‌：
    每孔加50μL终止液，混匀后450nm测定OD值。
    五、结果计算‌
    标准曲线‌：以标准品浓度（ng/mL）为横坐标，OD值为纵坐标，绘制四参数拟合曲线。
    样本浓度‌：样本OD值代入曲线方程，乘以稀释倍数（如有）。
    六、性能参数‌
    灵敏度‌：检测下限≤1.0ng/mL。
    特异性‌：不与结构类似物交叉反应。
    精密度‌：板内/板间变异系数<15%。
    回收率‌：80%-120%（加标测试验证）。
    七、注意事项‌
    试剂平衡‌：使用前室温平衡20分钟，洗涤液结晶需水浴溶解。
    加样控制‌：
    样本OD值超标准品范围时，用稀释液稀释后重测。
    避免枪头交叉污染，加样时间≤5分钟（多样本用排枪）。
    显色与终止‌：
    TMB避光保存，终止后30分钟内读数。
    废弃物处理‌：按生物危害物处置。
    八、常见问题‌
    无信号‌：检查试剂活性、孵育时间、洗涤步骤。
    高背景‌：增加洗涤次数，更换封板膜。
    重复性差‌：校准移液器，统一操作条件。
    注：以上仅供参考，本产品仅供科研使用，不作为实际数据，实验需严格遵循说明或咨询技术老师。
    大鼠糖化血红蛋白A1c(GHbA1c)ELISA试剂盒实验使用说明书本生一直视质量控制为企业的生命，追求企业竞争力的不断提升。公司在经营中始终秉承：遵纪守法，严于律己，宽仁以待，敢于承担的企业精神作为标准，以过硬的质量和优良的服务来维护和拓展市场，较大限度的满足客户的需求。与客户的共赢，是我们的发展目标，本生，您信任的合作伙伴！