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技术资料/正文
57 人阅读发布时间:2025-10-22 08:53
人8羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)ELISA试剂盒实验使用说明
BS-0327 人8羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)ELISA试剂盒
一、实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)技术.纯化的人8羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)捕获抗体包被微孔板,形成固相抗体。加入样本后,样本中的8-OHdG与HRP标记的检测抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物。彻底洗涤后,加入底物TMB显色,TMB在过氧化物酶催化下转化为蓝色,并在酸作用下转为黄色。颜色的深浅与样本中8-OHdG含量呈正相关,通过酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品含量.
二、试剂盒组成
标准品:浓度依次为16、8、4、2、1、0 ng/mL。
酶标包被板:预包被8-OHdG捕获抗体。
酶标试剂:HRP标记的检测抗体。
显色剂:TMB底物。
终止液:终止显色反应。
浓缩洗涤液:20倍浓缩,需稀释后使用。
样品稀释液:用于样本稀释。
三、样本处理
血清/血浆:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟(2000-3000转/分),收集上清,避免沉淀。
尿液:无菌管收集,离心20分钟(2000-3000转/分),收集上清。
组织/细胞:按相关文献提取DNA,避免反复冻融。
注意事项:样本不能含NaN3,以免yizhiHRP活性.
四、操作步骤
标准品稀释:按说明书梯度稀释标准品。
加样:依次加入样本、标准品、酶标试剂至微孔,温育.
洗涤:用洗涤液彻底洗涤,拍干孔内液体。
显色:加入TMB底物,避光温育。
终止:加入终止液,终止反应。
测定:450nm波长下测定OD值.
五、注意事项
显色控制:显色时间过短导致结果偏低,过长则增加非特异性显色.
洗涤关键:洗涤需彻底,避免孔内液体溢出,拍干后及时更换吸水纸.
试剂保存:试剂盒2-8℃冷藏,切勿冷冻;有效期通常为6个月.
操作环境:避免强光直射,使用前平衡试剂至室温。
六、结果计算
通过标准曲线计算样品中8-OHdG浓度,OD值与浓度呈正相关。
注:以上仅供参考,不作为实际数据,实验需严格遵循说明或咨询技术老师。 Elisa试剂盒
人8羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)ELISA试剂盒实验使用说明 本生一直视质量控制为企业的生命,追求企业竞争力的不断提升。公司在经营中始终秉承:遵纪守法,严于律己,宽仁以待,敢于承担的企业精神作为标准,以过硬的质量和优良的服务来维护和拓展市场,较大限度的满足客户的需求。与客户的共赢,是我们的发展目标,本生,您信任的合作伙伴!