人通用转录复合体(GTC)ELISA试剂盒实验使用说明书

　　人通用转录复合体(GTC)ELISA试剂盒实验使用说明书

　　BS-1281人通用转录复合体(GTC)ELISA试剂盒

　　一、实验原理

　　本试剂盒采用双抗体夹心法，通过固相抗体捕获样本中的GTC抗原，再与酶标记抗体结合形成复合物，经底物显色后测定吸光度值，实现GTC浓度的定量分析。

　　二、试剂盒组成

　　预包被抗GTC抗体的微孔板(96孔)

　　酶标记抗体工作液

　　标准品(含已知浓度GTC)

　　10×样本稀释液

　　20×浓缩洗涤液

　　底物溶液(TMB)

　　终止液(硫酸溶液)

　　封板膜

　　三、样本准备

　　样本类型：血清、血浆、细胞培养上清液等生物体液。

　　保存条件：

　　短期保存(2-8℃)：不超过48小时。

　　长期保存：-20℃或-70℃冷冻，避免反复冻融。

　　稀释方法：使用前将10×样本稀释液用蒸馏水按1:10比例稀释(如1ml浓稀释液+9ml蒸馏水)。

　　四、实验步骤

　　1. 试剂准备

　　洗涤液配制：将20×浓缩洗涤液用蒸馏水按1:20稀释(如1ml浓缩液+19ml蒸馏水)。

　　2. 加样

　　每孔加入100μL标准品或待测样本(稀释后)。

　　37℃孵育120分钟，确保充分反应。

　　3. 洗涤

　　甩尽孔内液体，用洗涤液洗涤4-6次，每次300μL，浸泡30-60秒。

　　最后一次洗涤后，在吸水纸上拍干孔内液体。

　　4. 酶标记抗体反应

　　每孔加入100μL酶标记抗体工作液。

　　37℃孵育60分钟。

　　5. 显色与终止

　　每孔加入100μL底物溶液(TMB)，室温避光孵育15分钟。

　　每孔加入100μL终止液终止反应，溶液颜色由蓝变黄。

　　6. 测定

　　终止后30分钟内，用酶标仪在450nm波长下测定各孔吸光度(OD值) 。

　　五、结果计算

　　标准曲线绘制：以标准品浓度为横坐标，对应OD值为纵坐标绘制标准曲线。

　　样本浓度计算：根据样本OD值从标准曲线中读出GTC浓度。

　　六、注意事项

　　实验前所有试剂需恢复至室温(18-25℃)。

　　避免底物溶液接触强光，防止提前显色。

　　洗涤步骤需彻底，减少背景信号干扰。

　　不同批号试剂不可混用，以免影响实验结果。

　　注：以上仅供参考，不作为实际数据，实验需严格遵循说明或咨询技术老师。 Elisa试剂盒

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