人谷胱甘肽S转移酶Mu1(GSTM1)ELISA试剂盒实验使用说明书

　　人谷胱甘肽S转移酶Mu1(GSTM1)ELISA试剂盒实验使用说明书

　　BS-1620人谷胱甘肽S转移酶Mu1(GSTM1)ELISA试剂盒

　　一、产品简介

　　本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)定量检测人血清、血浆或细胞裂解液中GSTM1蛋白浓度。GSTM1是谷胱甘肽S-转移酶家族的重要成员，参与细胞解毒和抗氧化应激过程，其活性检测对研究药物代谢、疾病机制及环境毒素暴露评估具有重要意义。

　　二、试剂盒组成

　　组分 96孔配置 48孔配置 保存条件

　　预包被GSTM1抗体板条 12×8条 12×4条 2-8℃密封干燥

　　标准品(冻干) 6管 6管 -20℃长期保存

　　酶标抗体(HRP标记) 1瓶 1瓶 2-8℃避光

　　显色底物(TMB) 1瓶 1瓶 2-8℃避光

　　终止液(2M H₂SO₄) 1瓶 1瓶 室温

　　洗涤液(20×浓缩) 1瓶 1瓶 2-8℃

　　自备物品‌：

　　酶标仪(450nm波长)

　　精密移液器(2-20μL、20-200μL、200-1000μL)及无酶枪头

　　37℃恒温箱

　　蒸馏水或去离子水

　　三、样本准备与处理

　　1. 血清/血浆样本

　　收集‌：使用无热原试管，4℃静置30分钟使血液凝固，3000×g离心10分钟分离血清。避免溶血或反复冻融。

　　保存‌：立即检测或分装后-80℃冻存，避免反复冻融。

　　2. 细胞裂解液样本

　　制备‌：收集对数生长期细胞，PBS洗涤后加入裂解缓冲液(含蛋白酶抑制剂)，冰上裂解30分钟。

　　离心‌：12000×g、4℃离心15分钟，取上清液检测。蛋白浓度建议调整至0.5-1.0 mg/mL。

　　3. 组织样本

　　匀浆‌：取100-200mg组织，加入预冷生理盐水，冰浴匀浆。3000×g离心10分钟取上清。

　　注意事项‌：样本处理全程冰上操作，防止酶失活。

　　四、实验步骤

　　1. 试剂准备

　　洗涤液‌：浓缩液用蒸馏水1:20稀释，如有结晶可37℃水浴溶解。

　　标准品‌：每管加1mL蒸馏水复溶，静置15分钟，轻柔混匀。浓度梯度：0、5、10、20、40、80 ng/mL。

　　2. 加样与孵育

　　板条平衡‌：从铝箔袋取出板条，室温平衡20分钟。

　　加样‌：

　　标准孔：每孔加50μL标准品。

　　样本孔：加10μL样本+40μL样本稀释液。

　　空白孔：不加任何试剂。

　　孵育‌：37℃避光孵育60分钟。

　　3. 洗涤与显色

　　洗涤‌：弃去液体，每孔加满洗涤液，静置1分钟后甩干，重复5次。

　　加酶标抗体‌：每孔加100μL HRP标记抗体，37℃孵育30分钟。

　　洗涤‌：同步骤1。

　　显色‌：每孔加TMB底物50μL，37℃避光孵育15分钟。

　　终止‌：每孔加终止液50μL，15分钟内测定OD值。

　　4. 结果测定

　　读数‌：酶标仪450nm波长检测，参考波长630nm(可选)。

　　标准曲线‌：以标准品浓度为横坐标，OD值为纵坐标，绘制四参数拟合曲线。样本浓度通过曲线方程计算，乘以稀释倍数(如5倍)得实际值。

　　五、注意事项

　　试剂保存‌：未使用板条立即放回铝箔袋，2-8℃密封保存;显色底物避光。

　　操作规范‌：

　　避免试剂接触皮肤，终止液具腐蚀性。

　　加样时枪头不接触孔壁，防止交叉污染。

　　样本处理‌：

　　避免反复冻融，冻存样本使用前室温平衡。

　　浑浊样本需离心澄清。

　　质量控制‌：

　　空白孔OD值应接近0。

　　标准品线性回归R²≥0.98。

　　六、性能指标

　　灵敏度‌：最低检测限≤0.5 ng/mL。

　　精密度‌：批内变异系数(CV)<10%，批间CV<15%。

　　回收率‌：80%-120%。

　　线性范围‌：标准曲线覆盖1-100 ng/mL。

　　注：以上仅供参考，本产品仅供科研使用，不作为实际数据，实验需严格遵循说明或咨询技术老师。

　　人谷胱甘肽S转移酶Mu1(GSTM1)ELISA试剂盒实验使用说明书 本生一直视质量控制为企业的生命，追求企业竞争力的不断提升。公司在经营中始终秉承：遵纪守法，严于律己，宽仁以待，敢于承担的企业精神作为标准，以过硬的质量和优良的服务来维护和拓展市场，较大限度的满足客户的需求。与客户的共赢，是我们的发展目标，本生，您信任的合作伙伴!本生试剂盒