小鼠血管紧张素(Ang)ELISA试剂盒实验使用说明书

    小鼠血管紧张素(Ang)ELISA试剂盒实验使用说明书
    BS-9857人血管紧张素(Ang)ELISA试剂盒
    一、试剂盒概述
    本试剂盒用于体外定量检测小鼠血清、血浆、细胞培养上清液等生物样本中血管紧张素(Angiotensin,Ang)的含量。采用双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)，具有高灵敏度和特异性，适用于科研实验用途，不可用于临床诊断^^1^^2^^。
    二、试剂盒组成
    预包被酶标板：96孔/48孔（抗Ang抗体包被）
    标准品：冻干粉（需用标准品稀释液复溶）
    样品稀释液：用于样本预处理
    生物素标记抗体：100×浓缩液（需稀释使用）
    辣根过氧化物酶标记亲和素(HRP-avidin)：100×浓缩液
    显色底物(TMB)：A/B液（避光保存）
    终止液：2M硫酸溶液
    浓缩洗涤液：20×（需用蒸馏水稀释）
    封板膜：一次性使用^^1^^2^^
    三、样本处理与保存
    样本类型：血清、血浆、细胞培养上清液
    采集要求：
    使用无热原、无内毒素试管（EDTA/肝素抗凝）
    避免溶血或高脂样本，离心去除悬浮物
    保存条件：
    短期（≤48小时）：2-8℃
    长期：-20℃或-80℃（避免反复冻融）^^2^^3^^
    四、实验步骤
    1.试剂准备
    洗涤液：浓缩液按1:19比例用蒸馏水稀释（如1ml浓缩液+19ml蒸馏水）
    生物素标记抗体工作液：按1:99比例稀释（如1μl抗体+99μl抗体稀释液）
    HRP-avidin工作液：按1:99比例稀释（临用前1小时内配制）
    2.标准品梯度稀释
    取7支离心管，标注浓度梯度（如6000pg/ml至93.8pg/ml）
    每管加入200μl标准品稀释液，依次倍比稀释（首管加入200μl原液，混匀后转移至次管）
    3.加样与孵育
    每孔加入100μl标准品或样本（建议设复孔）
    37℃孵育90分钟
    洗板3次（每次浸泡1分钟，每孔≥300μl洗涤液）
    加入100μl生物素标记抗体工作液，37℃孵育60分钟
    洗板3次后，加入100μlHRP-avidin工作液，37℃孵育30分钟^^1^^
    4.显色与终止
    每孔加入100μlTMB底物液，避光室温显色15-30分钟
    加入100μl终止液终止反应（溶液变黄）^^1^^2^^
    5.结果读取
    酶标仪450nm波长测定吸光度（OD值）
    以标准品浓度对数为横坐标，OD值为纵坐标绘制标准曲线，计算样本浓度^^1^^
    五、注意事项
    试剂保存：
    未开封试剂盒：2-8℃或-20℃（频繁使用建议2-8℃）
    显色底物：避光保存，避免金属离子污染^^1^^
    操作规范：
    加样时间控制在5分钟内，推荐使用多通道移液器
    洗涤需彻底，避免交叉污染
    每批次实验需同步绘制标准曲线^^3^^
    异常处理：
    浓缩洗涤液结晶：37℃水浴助溶
    样本OD值过高：用样品稀释液稀释后重新测定^^3^^
    六、性能参数
    检测范围：0.78-50ng/ml（Ang-I）或3.12-200ng/ml（Ang-II）^^1^^2^^
    最低检测限：0.195ng/ml（Ang-I）
    特异性：不与其他相关蛋白交叉反应^^1^^
    七、有效期与运输
    有效期：6个月（2-8℃）或12个月（-20℃）
    运输条件：低温冰袋运输，避免反复冻融^^1^^
    注：以上仅供参考，不作为实际数据，实验需严格遵循说明或咨询技术老师。Elisa试剂盒
    小鼠血管紧张素(Ang)ELISA试剂盒实验使用说明书本生一直视质量控制为企业的生命，追求企业竞争力的不断提升。公司在经营中始终秉承：遵纪守法，严于律己，宽仁以待，敢于承担的企业精神作为标准，以过硬的质量和优良的服务来维护和拓展市场，较大限度的满足客户的需求。与客户的共赢，是我们的发展目标，本生，您信任的合作伙伴！本生试剂盒