人Ⅰ型前胶原C末端肽(CⅠCP)ELISA试剂盒实验使用说明书

　　人Ⅰ型前胶原C末端肽(CⅠCP)ELISA试剂盒实验使用说明书

　　BS-0828 人Ⅰ型前胶原C末端肽(CⅠCP)ELISA试剂盒

　　实验原理

　　本试剂盒采用双抗体夹心法ELISA技术，通过包被单抗的微孔板捕获样本中的CⅠCP抗原，再与HRP标记的二抗结合形成复合物。经TMB底物显色后，450nm波长下测定吸光度(OD值)，其与CⅠCP浓度呈正相关。

　　试剂盒组成

　　核心组件：

　　预包被微孔板(12孔×8条)

　　CⅠCP标准品(80-2.5 U/L梯度浓度)

　　HRP标记检测抗体、显色剂(TMB)、终止液

　　浓缩洗涤液(需30倍稀释)

　　辅助材料：样本稀释液、封板膜、密封袋等。

　　操作步骤

　　样本处理：

　　血清/血浆：3000rpm离心10分钟，避免溶血;若需保存，-20℃分装防反复冻融。

　　标准品稀释：

　　原倍标准品(80 U/L)按2倍梯度稀释至5个浓度点。

　　加样与孵育：

　　每孔加标准品/样本50μl，37℃孵育30分钟;

　　洗涤5次后加入HRP抗体，重复孵育。

　　显色与测定：

　　加入TMB避光显色15分钟，终止液终止反应后读取OD值。

　　注意事项

　　样本要求：避免NaN3(抑制HRP活性)，溶血样本需重新采集。

　　操作规范：

　　加样时避免触碰孔壁，显色前摇匀试剂;

　　超范围样本需用稀释液调整后复测。

　　保存条件：试剂盒2-8℃避光保存，使用前室温平衡20分钟。

　　数据计算

　　通过标准曲线拟合样本OD值，乘以稀释倍数(若有)得实际浓度。

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