人凋亡相关因子(FASCD95)ELISA试剂盒使用说明书

　　人凋亡相关因子(FAS/CD95)ELISA试剂盒使用说明书

　　BS-0009人凋亡相关因子(FAS/CD95)ELISA试剂盒

　　实验原理

　　本试剂盒采用双抗体夹心法检测样本中FAS/CD95浓度，其核心步骤包括：

　　抗原捕获：预包被的FAS单抗与样本中抗原结合形成固相复合物;

　　信号放大：加入生物素标记的二抗与HRP酶偶联物，通过酶促反应显色;

　　定量分析：TMB底物在450nm波长下检测吸光度，浓度与OD值呈正相关^^。

　　操作流程

　　样本处理

　　血清/血浆：静置10-20分钟后离心(2000-3000rpm，20分钟)，避免溶血;

　　细胞上清：需清除颗粒物，推荐原液检测或预实验确定稀释倍数。

　　试剂准备

　　洗涤液：20倍浓缩液用蒸馏水稀释至1倍;

　　标准品梯度：4000pg/ml母液按2000、1000、500、250、125、62.5、31.25、0 pg/ml稀释。

　　检测步骤

　　加样：标准品/样本(50μl/孔)与检测抗体温育1小时;

　　显色：TMB底物避光反应15分钟，2Mliusuan终止;

　　读数：酶标仪450nm波长测定，标准曲线计算浓度。

　　关键注意事项

　　样本要求：避免高血脂或反复冻融样本，-80℃保存不超过3个月;

　　试剂稳定性：未拆板条2-8℃保存，标准品溶解后需分装冻存;

　　质量控制：建议设置复孔，回收率应达80-120%;

　　安全防护：处理血液样本需按生物安全规范操作。

　　数据分析

　　标准曲线需满足R²≥0.99，样本浓度超出范围时需调整稀释倍数。典型灵敏度为7pg/ml，检测范围31.25-2000pg/ml^^1^^。

　　注：以上仅供参考，不作为实际数据，实验需严格遵循说明或咨询技术老师。

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