猪高密度脂蛋白(HDL)ELISA试剂盒实验使用说明书

　　猪高密度脂蛋白(HDL)ELISA试剂盒实验使用说明书

　　BS-4707 猪高密度脂蛋白(HDL)ELISA试剂盒

　　以下是猪高密度脂蛋白(HDL)ELISA试剂盒的实验使用说明综合整理：

　　一、实验原理

　　采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。预先包被HDL捕获抗体的微孔板中依次加入标本、标准品和HRP标记检测抗体，经温育洗涤后，通过TMB显色反应(蓝色→黄色)测定450nm吸光度，颜色深浅与HDL浓度呈正相关。

　　二、样本处理要求

　　血清‌：采集后1000×g离心10分钟分离，避免溶血或脂血;

　　血浆‌：EDTA/肝素抗凝，1000×g离心30分钟去除颗粒;

　　组织匀浆‌：需充分匀浆后离心取上清;

　　保存‌：2-8℃可存7天，长期需分装于-20℃以下，避免反复冻融。

　　三、试剂盒组成

　　预包被微孔板

　　HDL标准品(不同浓度)

　　HRP标记检测抗体

　　TMB显色底物、终止液

　　洗涤缓冲液(20×浓缩需稀释)

　　四、操作步骤

　　加样‌：

　　标准品孔：梯度浓度各50μL;

　　样本孔：样本40μL+稀释液10μL(5倍稀释);

　　孵育‌：37℃避光温育60分钟，封板膜密封;

　　洗涤‌：弃液后加洗涤液静置30秒，重复5次，拍干;

　　显色‌：每孔加TMB底物50μL，37℃避光显色15分钟;

　　终止‌：加终止液50μL，15分钟内测定450nm OD值。

　　五、注意事项

　　试剂保存‌：未使用板条需密封防潮，2-8℃保存;

　　操作规范‌：

　　不同批号试剂勿混用;

　　移液误差需<2%，避免产生气泡;

　　显色后颜色异常(如深蓝色)需弃用;

　　质量控制‌：

　　批内CV<10%，批间CV<12%;

　　每批次实验需同步标准曲线。

　　六、结果计算

　　以标准品浓度为横坐标，OD值为纵坐标绘制曲线，通过样本OD值计算浓度。

　　注：本试剂盒仅限科研使用，不可用于临床诊断，以上资料仅供参考，具体请咨询技术老师。

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