兔子白介素1β(IL-1β)ELISA试剂盒实验使用说明书

　　以下是兔子白介素1β(IL-1β)ELISA试剂盒的实验使用说明综合整理：

　　BS-4207  兔子白介素1β(IL-1β)ELISA试剂盒

　　一、实验原理

　　采用双抗体夹心法：包被抗IL-1β抗体的微孔板捕获样本中的IL-1β，再与HRP标记的检测抗体结合形成复合物，TMB显色后通过OD值定量分析。

　　二、试剂盒组成

　　标准品‌：通常为冻干粉(如2700ng/L)，需用稀释液复溶

　　酶标试剂‌：HRP标记的检测抗体(3ml/6ml)

　　洗涤缓冲液‌：50×浓缩液，需蒸馏水稀释

　　底物(TMB)‌和‌终止液‌各12ml

　　封板膜‌、‌密封袋‌及说明书

　　三、样本处理要求

　　血清/血浆‌：

　　避免溶血，离心条件：2000-3000rpm×10-30分钟

　　短期保存于2-8℃，长期需-20℃以下分装，避免反复冻融

　　组织匀浆‌：

　　按重量加入PBS匀浆，离心取上清

　　细胞上清‌：

　　离心去除碎片后分装冻存

　　注意事项‌：

　　避免使用含NaN3的样本(抑制HRP活性)

　　四、操作步骤

　　标准品稀释‌：梯度稀释至7个浓度，第8孔为空白对照

　　加样‌：

　　标准品/样本各加50-100μl，37℃孵育1-2小时

　　洗涤‌：

　　使用稀释后的洗涤液，洗板4-6次，拍干

　　显色‌：

　　加TMB避光反应15-30分钟，终止后15分钟内测OD450nm

　　五、注意事项

　　试剂使用前需平衡至室温，避免泡沫产生

　　不同批号试剂不可混用，底物需避光保存

　　显色后若OD值超出标准曲线范围，需稀释样本复测

　　六、数据计算

　　以标准品浓度为横坐标、OD值为纵坐标绘制曲线，通过回归方程计算样本浓度。

　　注：以上资料仅供参考，如需具体品牌试剂盒的完整说明书，可参考对应厂商提供的文档。

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