猪黄体生成素（LH）ELISA试剂盒实验使用说明书

　　以下是猪黄体生成素(LH)ELISA试剂盒的实验使用说明综合整理：

　　BS-4691 猪黄体生成素(LH)ELISA试剂盒

　　一、试剂盒组成

　　预包被板条‌：96孔或48孔微孔板(可拆卸)

　　标准品‌：通常包含6个浓度梯度(如0-160 ng/mL)

　　检测溶液‌：包括HRP标记抗体、TMB底物、终止液等

　　洗涤液‌：30倍浓缩液，需蒸馏水稀释

　　二、样本处理

　　血清/血浆‌：采集后室温静置1-2小时，3000rpm离心15分钟，避免溶血或反复冻融

　　组织匀浆‌：用预冷PBS(含蛋白酶抑制剂)研磨，5000×g离心取上清

　　保存条件‌：短期存于2-8℃，长期需-20℃以下保存

　　三、实验步骤

　　平衡试剂‌：所有试剂室温平衡30分钟后再使用

　　加样‌：

　　标准品孔：50μL梯度浓度标准品

　　样本孔：10μL样本+40μL稀释液

　　孵育‌：37℃避光温育60分钟，需加盖封板膜防止蒸发

　　洗涤‌：手工洗板需重复5次，拍干残留液体

　　显色‌：每孔加TMB底物50μL，37℃避光显色15分钟

　　终止与检测‌：加终止液后15分钟内测450nm OD值

　　四、注意事项

　　操作规范‌：避免底物接触金属器具，显色后及时终止

　　质量控制‌：建议标准品和样本做复孔，减少误差

　　失效提示‌：若标准曲线R²<0.99需重试

　　五、结果计算

　　通过标准曲线拟合方程计算样本浓度，线性范围为9.375-600 mIU/mL。

　　如需更详细说明，可参考具体试剂盒附带的说明书。

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