牛热休克蛋白-70抗体(HSP-70-Ab)ELISA试剂盒实验使用说明书

　　牛热休克蛋白-70抗体(HSP-70-Ab)ELISA试剂盒实验使用说明书

　　以下是牛热休克蛋白-70抗体(HSP-70-Ab)ELISA试剂盒的实验使用说明摘要：

　　BS-3989 牛热休克蛋白-70抗体(HSP-70-Ab)ELISA试剂盒

　　一、实验原理

　　采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。通过包被抗体捕获样本中的HSP-70-Ab，加入HRP标记检测抗体后，经TMB显色反应，颜色深浅与目标物浓度成正比。

　　二、试剂盒组成

　　主要组分‌：

　　预包被微孔板(96孔)

　　冻干标准品(通常含2瓶，需用稀释液 reconstitute 至10 ng/mL)

　　样品稀释液(20mL)

　　HRP标记检测抗体(120μL，需1:100稀释)

　　TMB显色底物(A/B液分装)

　　终止液(2N H2SO4)

　　自备物品‌：

　　酶标仪(450nm滤光片)

　　微量移液器及吸头

　　37℃恒温箱

　　三、样本处理

　　血清/血浆‌：3000rpm离心10-30分钟，避免溶血或反复冻融。

　　组织匀浆‌：生理盐水匀浆后离心取上清。

　　保存‌：分装后-20℃冻存，避免反复冻融。

　　四、操作步骤

　　试剂平衡‌：所有组分室温平衡15-30分钟。

　　标准品稀释‌：从10 ng/mL起始进行倍比稀释(建议7个梯度)。

　　加样与孵育‌：

　　每孔依次加入样本/标准品(100μL)、检测抗体(50μL)，37℃孵育60分钟。

　　洗涤‌：使用稀释后的洗涤液(1:25)洗板5次。

　　显色‌：加入TMB底物，避光反应15分钟。

　　终止与检测‌：加终止液后30分钟内测450nm OD值。

　　五、注意事项

　　浓洗涤液结晶可37℃水浴溶解。

　　避免板条开封后受潮，未用完需密封保存。

　　不同批次试剂不可混用。

　　高浓度样本需预稀释(计算时乘以稀释倍数)。

　　六、结果计算

　　以标准品浓度为横坐标、OD值为纵坐标绘制曲线，样本浓度通过曲线方程计算。

　　注：以上资料仅供参考，具体如需完整说明，建议联系供应商获取。

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