大鼠肌钙蛋白Ⅰ(Tn-Ⅰ)ELISA试剂盒实验使用说明书

　　大鼠肌钙蛋白Ⅰ(Tn-Ⅰ)ELISA试剂盒实验使用说明书

　　BS-3253大鼠肌钙蛋白Ⅰ(Tn-Ⅰ)ELISA试剂盒

　　本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)定量检测大鼠血清、血浆、组织匀浆或细胞培养上清液中的肌钙蛋白Ⅰ(Tn-Ⅰ)浓度。肌钙蛋白Ⅰ是心肌损伤的特异性标志物，其浓度变化与心肌疾病严重程度密切相关。

　　二、试剂盒组成

　　组分规格(48孔)规格(96孔)保存条件

　　预包被酶标板8×6条8×12条4℃

　　标准品1支1支-20℃

　　生物素化检测抗体60μL120μL-20℃

　　酶结合物(SABC)6mL12mL4℃

　　TMB显色液(A/B)各3mL各6mL4℃避光

　　终止液6mL12mL室温

　　20×浓缩洗涤液30mL60mL室温

　　三、实验步骤

　　1. 样本准备

　　血清/血浆：使用EDTA或肝素抗凝管采集，室温静置30分钟后离心(3000 rpm，10分钟)，取上清液。避免溶血样本。

　　组织匀浆：按1:9(w/v)加入生理盐水，机械匀浆后离心取上清。

　　保存条件：短期(2-8℃)可保存48小时，长期需分装后-20℃或-80℃保存，避免反复冻融。

　　2. 标准品稀释

　　取7支离心管，标记为1/2、1/4、1/8、1/16、1/32、1/64、空白(Blank)。每管加入200μL标准品稀释液，从第一管开始依次倍比稀释，最终浓度范围为31.2-2000 ng/mL。

　　3. 加样与孵育

　　每孔加入100μL标准品或样本，37℃孵育90分钟。

　　洗板3次(每次拍干孔内液体)。

　　加入100μL生物素化抗体(按1:100稀释)，37℃孵育60分钟。

　　洗板3次后，加入100μL SABC复合物，37℃孵育30分钟。

　　再次洗板5次，加入90μL TMB显色液(A/B等体积混合)，室温避光反应15-20分钟。

　　4. 终止与读数

　　每孔加入50μL终止液，立即在450nm波长下测定吸光度(OD值) 。

　　四、注意事项

　　试剂保存：未开封试剂盒需4℃保存;标准品、生物素化抗体等分装后-20℃保存，避免反复冻融。

　　操作规范：

　　使用一次性吸头，避免交叉污染。

　　洗板需彻底拍干，但避免用力过猛导致孔内气泡。

　　TMB显色液需避光使用，终止后30分钟内读数。

　　安全防护：终止液含强酸，需戴手套操作;TMB显色液对皮肤有刺激性，接触后立即冲洗。

　　质量控制：每批次实验需设置空白孔、标准曲线孔，确保线性回归相关系数(r)≥0.990。

　　五、结果计算

　　以标准品浓度为横坐标，OD值为纵坐标绘制标准曲线，通过四参数逻辑回归拟合。样本浓度根据曲线方程计算，若超出线性范围需稀释后复测。

　　六、性能参数

　　检测范围：31.2-2000 ng/mL

　　灵敏度：≤1.0 ng/mL

　　精密度：批内变异系数(CV)<10%，批间CV<15%

　　稳定性：开封后试剂需1个月内使用完毕，标准品复溶后不可保存。

　　注：以上仅供参考，不作为实际数据，实验需严格遵循说明或咨询技术老师。

　　大鼠肌钙蛋白Ⅰ(Tn-Ⅰ)ELISA试剂盒实验使用说明书 本生一直视质量控制为企业的生命，追求企业竞争力的不断提升。公司在经营中始终秉承：遵纪守法，严于律己，宽仁以待，敢于承担的企业精神作为标准，以过硬的质量和优良的服务来维护和拓展市场，较大限度的满足客户的需求。与客户的共赢，是我们的发展目标。本生!您信任的合作伙伴。我们愿与您真诚合作，共创美好的未来。