大鼠胆碱酯酶(ChE)ELISA试剂盒实验使用说明书

    大鼠胆碱酯酶(ChE)ELISA试剂盒实验使用说明书
    BS-8568大鼠胆碱酯酶(ChE)ELISA试剂盒
    一、实验原理
    本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附法（ELISA）检测大鼠血清、血浆或组织匀浆中的胆碱酯酶（ChE）活性。‌包被抗体与样本中ChE结合形成复合物，通过酶标二抗显色反应，在450nm波长下测定吸光度值，与标准曲线对比计算样品浓度。
    二、试剂盒组成
    预包被96孔板（可拆）
    标准品（6个浓度梯度）
    酶标二抗（HRP标记）
    显色底物（TMB溶液）
    终止液（2MH₂SO₄）
    洗涤缓冲液（20×浓缩液）
    样本稀释液
    封板膜（建议使用白色遮光型以减少荧光背景干扰）‌
    三、样本处理
    血清/血浆‌：采集后室温静置30分钟，3000rpm离心15分钟，取上清液-20℃保存避免反复冻融。
    组织匀浆‌：按1:9比例加入生理盐水，冰浴研磨后离心取上清。
    注意事项‌：样本避免溶血，肝素抗凝血浆需特殊处理。
    四、实验步骤
    加样‌：每孔加入100μL标准品/样本，37℃孵育90分钟。
    洗涤‌：弃去孔内液体，用洗涤缓冲液（1:20稀释）洗涤3次，拍干。
    加酶标二抗‌：每孔加入100μL酶标二抗，37℃孵育60分钟。
    显色‌：每孔加入100μLTMB底物，37℃避光孵育15-20分钟。
    终止反应‌：每孔加入50μL终止液，混匀后立即测定。
    五、结果计算
    以标准品浓度（ng/mL）为横坐标，OD值（450nm）为纵坐标绘制标准曲线。
    根据样本OD值在标准曲线上对应浓度，乘以稀释倍数即为实际浓度。
    六、注意事项
    试剂平衡至室温后使用，避免反复冻融。
    洗涤步骤需彻底，残留洗涤液会影响结果准确性。
    显色时间控制在15-20分钟，避免过度显色导致误差。
    使用白色遮光封板膜可减少荧光检测中的背景干扰‌。
    不同批号试剂不可混用。
    七、性能指标
    灵敏度‌：检测下限0.1ng/mL
    线性范围‌：0.5-32ng/mL
    回收率‌：85%-105%
    批内/批间变异系数‌：<10%
    八、储存条件
    未开封试剂盒：2-8℃保存，有效期12个月
    开封后：酶标二抗-20℃保存，其他组分4℃保存
    九、常见问题处理
    现象可能原因解决方案
    显色浅试剂过期/孵育时间不足更换试剂/延长孵育时间
    标准曲线异常移液误差/洗涤不彻底校准移液器/增加洗涤次数
    背景高封板膜透光/洗涤不充分使用避光型封板膜‌/优化洗涤流程
    注：以上仅供参考！
    大鼠胆碱酯酶(ChE)ELISA试剂盒实验使用说明书本生一直视质量控制为企业的生命，追求企业竞争力的不断提升。公司在经营中始终秉承：遵纪守法，严于律己，宽仁以待，敢于承担的企业精神作为标准，以过硬的质量和优良的服务来维护和拓展市场，较大限度的满足客户的需求。与客户的共赢，是我们的发展目标，本生，您信任的合作伙伴！本生试剂盒