人血血小板衍生生长因子AB(PDGF-AB)ELISA试剂盒使用说明书

    人血血小板衍生生长因子AB(PDGF-AB)ELISA试剂盒使用说明书
    BS-0099人血血小板衍生生长因子AB(PDGF-AB)ELISA试剂盒
    一、试剂盒组成
    预包被抗人PDGF-AB抗体的96孔板
    标准品（6个浓度梯度，含冻干粉）
    生物素标记检测抗体
    辣根过氧化物酶标记链霉亲和素（HRP-Streptavidin）
    显色底物（TMB溶液）
    终止液（2M硫酸）
    20×浓缩洗涤液
    样品稀释液
    注：所有组分需2-8℃避光保存，标准品需-20℃长期保存^^1^^。
    二、实验原理
    采用双抗体夹心法：
    预包被抗体捕获样本中的PDGF-AB
    生物素标记二抗结合目标蛋白
    HRP标记物催化显色反应
    通过450nm波长测定吸光度，标准曲线定量^^2^^。
    三、操作步骤
    1.样本预处理
    血清/血浆样本：室温静置30分钟，3000rpm离心10分钟取上清
    细胞培养上清：直接检测，避免反复冻融
    组织匀浆：按组织重量加入9倍体积PBS，机械匀浆后离心取上清
    2.试剂准备
    洗涤液配制：将20×浓缩洗涤液用蒸馏水稀释至1×
    标准品复溶：每管加入0.5ml样品稀释液，静置15分钟混匀
    3.检测流程
    加样：每孔加入100μl标准品/样本（建议设复孔）
    温育：37℃避光反应90分钟
    洗板：每孔注满洗涤液，静置1分钟后拍干，重复5次
    加酶标抗体：每孔加入100μl生物素标记抗体，37℃避光60分钟
    加酶结合物：每孔加入100μlHRP标记物，37℃避光30分钟
    显色：每孔加入90μlTMB底物，37℃避光15分钟
    终止：每孔加入50μl终止液，立即测定OD值
    四、注意事项
    显色反应需严格避光，建议使用白色遮光封板膜覆盖反应板^^3^^
    洗涤时避免孔间交叉污染，拍干后立即进行下一步操作
    不同批号试剂组分不可混用
    终止液具有腐蚀性，操作需佩戴防护装备
    五、结果计算
    以标准品浓度为横坐标，OD值为纵坐标绘制标准曲线
    样本浓度通过标准曲线方程计算，乘以稀释倍数得到最终结果
    典型标准曲线范围：15.6-1000pg/ml，灵敏度≤5pg/ml^^4^^
    六、性能参数
    回收率：85%-115%
    批内变异系数：<10%
    批间变异系数：<15%
    有效期：12个月（-20℃保存标准品）
    注：以上仅供参考，不作为实验依据。
    人血血小板衍生生长因子AB(PDGF-AB)ELISA试剂盒使用说明书本生一直视质量控制为企业的生命，追求企业竞争力的不断提升。公司在经营中始终秉承：遵纪守法，严于律己，宽仁以待，敢于承担的企业精神作为标准，以过硬的质量和优良的服务来维护和拓展市场，较大限度的满足客户的需求。与客户的共赢，是我们的发展目标，本生，您信任的合作伙伴！本生试剂盒